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分享一下關于氯霉素檢測試劑具體實行方法
發布時間： 2022-02-24 點擊次數： 57次今天為大家分享一下關于氯霉素檢測試劑具體實行方法，話不多說下面讓我們一起來了解一下吧。
一、樣品制備
a) 將3克已均質的樣品放入15mL離心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震蕩5分鐘。
b) 用離心機離心1700×g10分鐘，取2mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮氣將有機溶劑吹干。
c) 在此玻璃管中加入正己烷1mL，先將殘余物完全溶解后，再加入1mL樣品稀釋液，震蕩30秒鐘。
d) 用離心機離心1700×g 10分鐘，利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷)，再吸取下層液(水層)備用。
稀釋倍數:1
若待測物為白蝦可按以下流程將樣品做8倍濃縮以增加檢品敏感度
a) 將6克已均質的樣品放入15mL離心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震蕩5分鐘。
b) 用離心機離心1700×g 10分鐘，取4mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮氣將有機溶劑吹干。
c) 在此玻璃管中加入正己烷2mL，先將殘余物完全溶解后，再加入0.5mL樣品稀釋液，震蕩30秒鐘。
d) 用離心機離心1700×g 10分鐘，利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷)，再吸取下層液(水層)備用。
稀釋倍數:0.125
二、操作步驟
1、于適當微孔中分別加入100mL標準溶液(0，0.05，0.15，0.45，1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標記物。
4、輕敲盤子四周，使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時。
5、將微孔中的反應液甩掉，再將洗液加滿每一微孔后甩掉，重復洗3次。
6、最后一次甩掉后，在吸水紙上拍干。
7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后，輕敲盤子四周，使其充分混合。
8、于室溫下避光靜置溫育20分鐘。
9、于每一微孔中加入100mL反應終止液。
10、用酶標儀于波長450nm下判讀。
三、判定結果
1. 計算B/B0值。用樣品或標準液吸光度值(B)除以零標準吸光度值(B0)再乘以100%。
2. 以B/B0值為縱坐標，以標樣濃度的對數值為橫坐標，做標準半對數曲線。
3. 根據每個樣品的B/B0值就可從曲線上讀出相對應樣品的濃度。
4. 由于樣品經過了預先稀釋，因此根據標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數。- 下一篇：氯霉素檢測除了主要的三類外還有其他的辦法
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