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      分享一下關于氯霉素檢測試劑具體實行方法

      發布時間: 2022-02-24  點擊次數: 57次
        今天為大家分享一下關于氯霉素檢測試劑具體實行方法,話不多說下面讓我們一起來了解一下吧。
       
        一、樣品制備
       
        a) 將3克已均質的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震蕩5分鐘。
       
        b) 用離心機離心1700×g10分鐘,取2mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,于50℃下,利用氮氣將有機溶劑吹干。
       
        c) 在此玻璃管中加入正己烷1mL,先將殘余物完全溶解后,再加入1mL樣品稀釋液,震蕩30秒鐘。
       
        d) 用離心機離心1700×g 10分鐘,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
       
        稀釋倍數:1
       
        若待測物為白蝦可按以下流程將樣品做8倍濃縮以增加檢品敏感度
       
        a) 將6克已均質的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震蕩5分鐘。
       
        b) 用離心機離心1700×g 10分鐘,取4mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,于50℃下,利用氮氣將有機溶劑吹干。
       
        c) 在此玻璃管中加入正己烷2mL,先將殘余物完全溶解后,再加入0.5mL樣品稀釋液,震蕩30秒鐘。
       
        d) 用離心機離心1700×g 10分鐘,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
       
        稀釋倍數:0.125
       
        二、操作步驟
       
        1、于適當微孔中分別加入100mL標準溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
       
        2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液。
       
        3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標記物。
       
        4、輕敲盤子四周,使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時。
       
        5、將微孔中的反應液甩掉,再將洗液加滿每一微孔后甩掉,重復洗3次。
       
        6、最后一次甩掉后,在吸水紙上拍干。
       
        7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后,輕敲盤子四周,使其充分混合。
       
        8、于室溫下避光靜置溫育20分鐘。
       
        9、于每一微孔中加入100mL反應終止液。
       
        10、用酶標儀于波長450nm下判讀。
       
        三、判定結果
       
        1. 計算B/B0值。用樣品或標準液吸光度值(B)除以零標準吸光度值(B0)再乘以100%。
       
        2. 以B/B0值為縱坐標,以標樣濃度的對數值為橫坐標,做標準半對數曲線。
       
        3. 根據每個樣品的B/B0值就可從曲線上讀出相對應樣品的濃度。
       
        4. 由于樣品經過了預先稀釋,因此根據標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數。
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